一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC 法作为分析方法，检测食品中赭曲霉毒素的残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用， 操作简便。
二、实验目标物
赭曲霉毒素(CAS:303-47-9)。
三、应用范围
本方法适用于粮油中赭曲霉毒素 A 残留的 HPLC 检测及确证。
四、参考标准
GB5009.96—2016《食品安全国家标准 食品中赭曲霉毒素 A 的测定》。
五、实验材料
广州菲罗门(FLM) Polyclean X-MAX 150 mg/6 mL(货号：9B-P003-06150)。
六、实验方法
1、样品提取
珍珠米
准确称取粉碎好珍珠米 5.0 g 置于 50 mL 离心管中，加入 25 mL 提取液（0.1mol/L 氢氧化钾溶液：甲醇：水=2:60:38），于振荡器振荡提取 20 min，4000 r/min 离心 5 min，取上层液 5 mL 备用。
酱油
准确称取酱油 5.0 g 置于 50 mL 离心管中，加入 20 mL 提取液（同 1.1），于振荡器中提取 20 min，4000 r/min 离心 5 min，取 5 mL 提取液备用。
2、SPE 柱净化
(1)活化：Polyclean X-MAX 小柱使用前用 5 mL 甲醇活化，3 mL 水，3 mL 提取液（同 1.1）平衡。
(2)上样和洗脱：取 5 mL 备用液过柱，弃去流出液；分别加 3 mL 淋洗液(0.1mol/L 氢氧化钾溶液：乙腈：水=3:50:47)，3 mL 水，3 mL 甲醇淋洗小柱，弃去流出液， 抽干小柱；用 5 mL 洗脱液(甲醇：乙腈：甲酸：水=40:50:7.5:2.5)洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。
(3)上机测试：洗脱液于 50 °C 下用氮气吹干，用 1 mL 初始流动相（2 %乙酸水： 乙腈=50.5:49.5）定容，经 0.22 μm 滤膜过滤，供上机测试。
3、HPLC 条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：SuperLu C18 (4.6 mm×250 mm,5μm)，也可用其它规格 C18 柱检测器：Waters 2475 荧光检测器
检测波长：激发波长 333 nm 发射波长 477 nm 等度洗脱： A：2 %乙酸水 B：乙腈=50.5：49.5 洗脱方式：等度洗脱, A : B=50.5 : 49.5
流速：1.0 mL/min
进样体积：20 μL
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1、4.0 μg/kg 食品基质中赭曲霉毒素的添加回收结果 表 1 4.0 μg/kg 食品基质中赭曲霉毒素的添加回收结果 
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2、 添加水平为 4.0 μg/kg 赭曲霉毒素检测的液相色谱图 |
七、实验结果
图 1 添加水平为 4.0 μg/kg 赭曲霉毒素检测的液相色谱图
