以下方案都是成功的客户端较好方案，因各种涉密性问题，不便获得图谱，如果您使用后，可以公开图谱，也将获得一份奖励！
方案一
样品前处理净化后，能照AOAC用Polyclean X-MAX 60mg/3ml.
HPLC测定：
色谱柱：Titank C18 5μ 250 × 4.6 mm（货号：FMG-5560-E0NU）
流动相：0.1 M KH2PO4溶液（用KOH溶液调节pH值至5.6）为流动相A；甲醇为流动相B
流速：0.5 mL/min
检测波长：260 nm
温度：40℃
梯度：
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时间(分钟) |
流动相A(%) |
流动相B(%) |
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0 |
100 |
0 |
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5 |
100 |
0 |
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14 |
90 |
10 |
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15 |
80 |
20 |
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35 |
80 |
20 |
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36 |
100 |
0 |
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50 |
100 |
0 |
方案二
不同的样品净化方法，采用反相SPE模式分离，与方案一中离子交换模式比较，对极性大的杂质去除更好。
样品制备：
精密称取奶粉5.0 g，加适量温水，超声10 min使溶解，加10%醋酸溶液5 mL，摇匀，静置，再加水定容至50 mL，摇匀，过滤，取上清液待用。
样品净化：
SPE小柱：Polyclean X-HLB 60mg/3mL（货号：9B-P001-06030）
活化：甲醇 3 mL
平衡：水 3 mL
上样：2 mL待净化液
冲洗：20%甲醇/水溶液 3 mL
合并上样流出液与冲洗流出液，再加水定容至5 mL，作为待测溶液。
HPLC测定：
色谱柱：Titank C18 5μ 250 × 4.6 mm（货号：FMG-5560-E0NU）
流动相：0.1 M K2HPO4溶液（用磷酸调节pH值至5.6）为流动相A；乙腈为流动相B
流速：1 mL/min
进样体积：5 μL
检测波长：260 nm
温度：常温
梯度：
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时间(分钟) |
流动相A(%) |
流动相B(%) |
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0 |
100 |
0 |
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8 |
100 |
0 |
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25 |
95 |
5 |
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27 |
75 |
25 |
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40 |
75 |
25 |
方案三
LC/MS测定：
色谱柱：Titank C18 5μ 250 × 4.6 mm（货号：FMG-5560-E0NU）
流动相：10 mM 乙酸铵，5 mM 碳酸氢铵（用乙酸调节pH值至5.6）为流动相A；甲醇为流动相B
流速：0.8 mL/min
检测器：质谱
梯度：
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时间(分钟) |
流动相A(%) |
流动相B(%) |
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0.0 |
100 |
0 |
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3.5 |
100 |
0 |
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10.0 |
80 |
20 |
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20.0 |
80 |
20 |
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21.0 |
100 |
0 |
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35.0 |
100 |
0 |
以上用柱，如果分离度太大想缩短时间，也可根据自身情况采用:
A. Titank C18 5u 150*4.6mm(货号：FMF-5560-EONU);
B. Titank C18 5u 100*4.6mm(货号：FMD-5560-EONU);
