QuEChERS AOAC方法用于大米中农药多残留的检测
（Rapid QuEChERS）
一、实验目的
本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作为样品的前处理方法，GC-ECD 和LC-MS/MS法作为分析方法，检测大米中的农药多残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、应用范围
本方法适用于含脂类和蜡类物质较多的水果、蔬菜和谷物等中农药多残留检测及确证
三、参考标准
《AOAC Official Method 2007.01: Pesticide Residues in Foods by Acetonitrile Extractionand Partitioning with Magnesium Sulfate》
四、实验材料
NuAnalytical Rapid QuEChERS提取管50 mL、Rapid QuEChERS净化管15 mL。
五、实验步骤
1、 样品提取
将大米在-18℃下冷冻，彻底粉碎。准确称取粉碎好的大米15.0 g于50mL离心管中，加入15 mL 1%乙酸乙腈溶液，再加入QuEChERS萃取盐包（6 g无水硫酸镁和1.5 g无水醋酸钠），用力振摇1min，4000r/min离心5min。上层乙腈层待净化。
2、样品净化
取待净化的上层乙腈层8mL于15 mL QuEChERS净化管(1.2g MgSO4、400mg PSA和400 mgC18)中，涡旋1min，4000 r/min离心5min。取上清液1mL，过0.2 μm滤膜，待上机测试。
3、仪器条件
（1）、GC-ECD条件
气相仪器：Agilent7890A
色谱柱：FB-5,30m×0.32mm，0.25μm
进样口温度：220 ℃
检测器温度：300℃
升温程序：180℃(保持2min)，以10℃/min升温到230℃(保持2min)，以2℃/min升温到260℃(保持2min)，以25℃/min升温到270 (保持1.6min)
|
u |
流速：1.6mL/min
进样方式：分流进样，分流比10:1
（2）、LC-MS/MS条件
色谱柱：SuperLuC18(2.0mm×150mm，5μm)
质谱仪：API4000
流动相：A:0.1%甲酸+10mM乙酸铵(取1 mL甲酸和0.77g乙酸铵至1 L水溶液中)
B:甲醇
洗脱方式：梯度洗脱，梯度洗脱程序如下：
|
|
保留时间/min |
A/% |
B/% |
|
|
0.0 |
95 |
5 |
|
|
|
1.5 |
95 |
5 |
|
|
|
6.0 |
5 |
95 |
|
|
|
11.0 |
5 |
95 |
|
|
|
11.01 |
95 |
5 |
|
|
|
15.0 |
95 |
5 |
|
|
|
流速：0.35mL/min |
柱温：40 |
℃ 进样体积：5μL |
|
离子源：电喷雾(ESI) |
扫描模式：正离子模式
检测方式：多反应监测(MRM)
质谱仪离子源参数如下：
氨基甲酸酯类农药各组分名称、保留时间及母离子和子离子检测离子对：
|
物质名称 |
保留时间/min |
检测离子对 |
DP |
EP |
CE |
CXP |
|
涕灭威 |
7.06 |
208.1/89.1 208.1/116 |
30 30 |
10 10 |
22 10 |
12 12 |
|
克百威 |
7.13 |
22.3/123.1 222.3/165.2 |
48 48 |
10 10 |
16 31 |
12 12 |
|
灭多威 |
6.51 |
163.2/88.1 163.2/106.1 |
36 36 |
10 10 |
15 12 |
12 12 |
|
涕灭威砜 |
6.25 |
223.1/86.2 223.1/148.1 |
69 69 |
10 10 |
21 13 |
12 12 |
|
涕灭威亚砜 |
6.10 |
207.1/132.2 207.1/89.1 |
60 60 |
10 10 |
13 22 |
12 12 |
|
甲萘威 |
7.18 |
202.1/145.2 202.1/127.1 |
58 58 |
10 10 |
12 40 |
12 12 |
|
多菌灵 |
6.82 |
192.1/160.1
192.1/132.2 |
68
68 |
10
10 |
34
42 |
12
12 |
六、实验结果
1、大米中农药多残留的添加回收结果
表1 0.2 mg/kg大米中有机氯类、拟除虫菊酯类农药多残留的添加回收结果
回收率（%）
|
名称 |
1 |
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
五氯硝基苯 |
92.0 |
101.5 |
103.3 |
98.9 |
6.14 |
|
乙烯菌核利 |
93.5 |
100.4 |
102.2 |
98.7 |
4.65 |
|
三唑酮 |
114.5 |
122.5 |
126.5 |
121.2 |
5.04 |
|
腐霉利 |
81.5 |
84.5 |
86.1 |
84.0 |
2.78 |
|
异菌脲 |
113.0 |
109.0 |
113.5 |
111.8 |
2.21 |
|
联苯菊酯 |
120.5 |
120.0 |
122.0 |
120.8 |
0.86 |
|
甲氰菊酯 |
100.5 |
99.3 |
101.5 |
100.4 |
1.10 |
|
高效氟氯氰菊酯 |
101.5 |
100.6 |
102.5 |
101.5 |
0.94 |
|
氟氯氰菊酯 |
101.7 |
96.7 |
96.3 |
98.2 |
3.06 |
|
氯氰菊酯 |
78.7 |
70.2 |
70.9 |
73.3 |
6.44 |
|
氟氰戊菊酯 |
126.0 |
130.0 |
119.5 |
125.2 |
4.23 |
|
氰戊菊酯 |
110.0 |
99.5 |
111.4 |
107.0 |
6.08 |
|
氟胺氰菊酯 |
100.5 |
100.2 |
97.45 |
99.4 |
1.69 |
|
溴氰菊酯 |
122.5 |
111.6 |
120.0 |
118.0 |
4.84 |
表2 0 05 mg/kg大米中氨基甲酸酯类农药多残留的添加回收结果
回收率（%）
|
名称 |
1 |
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
涕灭威 |
111.2 |
118.6 |
117.6 |
115.8 |
3.47 |
|
克百威 |
92.6 |
85.2 |
93.4 |
90.4 |
5.00 |
|
灭多威 |
90.0 |
101.4 |
98.2 |
96.5 |
6.09 |
|
多菌灵 |
70.6 |
79.4 |
70.2 |
73.4 |
7.08 |
|
涕灭威砜 |
107.2 |
114.0 |
111.6 |
110.9 |
3.11 |
|
涕灭威亚砜 |
114.0 |
119.8 |
117.8 |
117.2 |
2.51 |
|
甲萘威 |
92.4 |
98.4 |
92.0 |
94.3 |
3.80 |
2、 大米中农药多残留检测色谱图
图1 添加水平为0.2 mg/kg大米中有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留检测色谱图
图2 添加水平为0.05 mg/kg大米中氨基甲酸酯类农药多残检测色谱图
