QuEChERS EN方法用于大米中农药多残留的检测
（Rapid QuEChERS）
一、实验目的
本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作为样品的前处理方法，GC-ECD和LC-MS/MS法作为分析方法，检测大米中的农药多残留。该方法可简化样品的前处理过程， 节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、应用范围
本方法适用于含脂类和蜡类物质较多的水果、蔬菜和谷物等中农药多残留检测及确证
三、参考标准
《BS EN 15662:2008 Foods of plant origin-Determination of pesticide residues using GC-MS and/or LC-MS/MS following acetonitrile extraction/partitioning and clean-up by dispersive SPE-QuEChERS-method》
四、实验材料
NuAnalyticalRapid QuEChERS提取管50mL、Rapid QuEChERS净化管15 mL。
五、实验步骤
1、 样品提取
将大米在-18℃下冷冻，彻底粉碎。准确称取粉碎好的大米10.0g于50mL离心管中，加入10mL乙腈，振摇1min;再加入QuEChERS萃取盐包（4g无水硫酸镁、1g氯化钠、1g柠檬酸钠和0.5g柠檬酸氢二钠），用力振摇1min，4000r/min离心5min。上层乙腈层待净化。。
2、样品净化
取待净化的上层乙腈层6mL于15mL QuEChERS净化管(900mgMgSO4、150mgPSA和150mg C18)中，涡旋1min，4000r/min离心5min。取上清液1mL，过0.22μm滤膜，待上机测试。
3、仪器条件
（1）、GC-ECD条件
气相仪器：Agilent7890A
色谱柱：FB-5，30m×0.32mm，0.25μm
进样口温度：220℃
检测器温度：300℃
升温程序：180℃(保持2 min)，以10℃/min升温到230℃(保持2min)，以2℃/min升温到260℃(保持2min)，以25℃/min升温到270℃(保持1.6min)
载气：氦气
流速：1.6mL/min
进样方式：分流进样，分流比10:1
（2）、LC-MS/MS条件
色谱柱：SuperLuC18(2.0mm×150mm，5μm)
质谱仪：API4000
流动相：A:0.1%甲酸+10mM乙酸铵(取1 mL甲酸和0.77g乙酸铵至1 L水溶液中)
B:甲醇
洗脱方式：梯度洗脱，梯度洗脱程序如下：
|
保留时间/min |
A/% |
B/% |
|
0.0 |
95 |
5 |
|
1.5 |
95 |
5 |
|
6.0 |
5 |
95 |
|
11.0 |
5 |
95 |
|
11.01 |
95 |
5 |
|
15.0 |
95 |
5 |
流速：0.35mL/min
柱温：40℃
进样体积：5μL
离子源：电喷雾(ESI)
扫描模式：正离子模式
检测方式：多反应监测(MRM)
质谱仪离子源参数如下：
|
Source/Gas |
|
|
Collision Gas (CAD) |
6 |
|
Curtain Gas (CUR) |
12 |
|
Ion Source Gas 1 (GS1) |
50 |
|
Ion Source Gas 2 (GS2) |
50 |
|
Ion Spray Voltage (IS) |
5500 |
|
Temperature (TEM) |
550 |
|
Interface Heater (IHE) |
ON |
氨基甲酸酯类农药各组分名称、保留时间及母离子和子离子检测离子对：
|
物质名称 |
保留时间/min |
检测离子对 |
DP |
EP |
CE |
CXP |
|
涕灭威 |
7.06 |
208.1/89.1 208.1/116 |
30 30 |
10 10 |
22 10 |
12 12 |
|
克百威 |
7.13 |
22.3/123.1 222.3/165.2 |
48 48 |
10 10 |
16 31 |
12 12 |
|
灭多威 |
6.51 |
163.2/88.1 163.2/106.1 |
36 36 |
10 10 |
15 12 |
12 12 |
|
涕灭威砜 |
6.25 |
223.1/86.2 223.1/148.1 |
69 69 |
10 10 |
21 13 |
12 12 |
|
甲萘威 |
7.18 |
202.1/145.2 202.1/127.1 |
58 58 |
10 10 |
12 40 |
12 12 |
|
多菌灵 |
6.82 |
192.1/160.1
192.1/132.2 |
68
68 |
10
10 |
34
42 |
12
12 |
六、实验结果
1、大米中农药多残留的添加回收结果
表1 0.2mg/kg大米中有机氯类、拟除虫菊酯类农药多残留的添加回收结果
|
名称 |
1 |
回收率（%）
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
五氯硝基苯 |
82.0 |
81.0 |
83.0 |
82.00 |
1.22 |
|
百菌清 |
84.0 |
86.0 |
91.5 |
87.17 |
4.46 |
|
乙烯菌核利 |
84.0 |
81.5 |
84.0 |
83.17 |
1.74 |
|
三唑酮 |
103.5 |
99.0 |
102.5 |
101.67 |
2.32 |
|
腐霉利 |
98.4 |
94.5 |
97.5 |
96.80 |
2.11 |
|
异菌脲 |
103.5 |
98.0 |
100.0 |
100.50 |
2.77 |
|
联苯菊酯 |
107.5 |
101.5 |
107.5 |
105.5 |
3.28 |
|
甲氰菊酯 |
86.5 |
81.5 |
85.0 |
84.33 |
3.04 |
|
高效氟氯氰菊酯 |
92.0 |
87.5 |
88.4 |
89.30 |
2.67 |
|
氟氯氰菊酯 |
87.6 |
85.45 |
85.8 |
86.28 |
1.34 |
|
氯氰菊酯 |
71.5 |
76.85 |
71.2 |
73.18 |
4.34 |
|
氟氰戊菊酯 |
131.2 |
123.2 |
124.5 |
126.30 |
3.40 |
|
氰戊菊酯 |
102.5 |
98.5 |
88.0 |
96.33 |
7.77 |
|
氟胺氰菊酯 |
92.9 |
90.4 |
90.7 |
91.33 |
1.49 |
|
溴氰菊酯 |
117.5 |
111.5 |
109.0 |
112.67 |
3.88 |
|
表2 0.05mg/kg黄瓜中氨基甲酸酯类农药多残留的添加回收结果 |
|||||
|
名称 |
1 |
回收率（%）
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
涕灭威 |
94.6 |
93.6 |
99.2 |
95.8 |
3.12 |
|
克百威 |
89.6 |
91.6 |
91.2 |
90.8 |
1.17 |
|
灭多威 |
107.6 |
114.4 |
111.2 |
11.07 |
3.06 |
|
多菌灵 |
75.8 |
82.0 |
82.6 |
80.13 |
4.70 |
|
涕灭威砜 |
97.2 |
104.4 |
101.2 |
100.93 |
3.57 |
|
涕灭威亚砜 |
93.0 |
100.0 |
101.6 |
98.20 |
4.66 |
|
甲萘威 |
86.6 |
85.8 |
92.6 |
88.33 |
4.21 |
图1 添加水平为0.2mg/kg大米中有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留检测色谱图
图2 添加水平为0.05mg/kg大米中氨基甲酸酯类农药多残留检测色谱图
