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生姜中涕灭威及其代谢物检测的固相萃取方法
（SuperClean NH2）
一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为生姜样品的前处理方法，LC-MS/MS 法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物
三种涕灭威及其代谢物标准品：涕灭威(CAS:116-06-03)，涕灭威砜(CAS:1646-88-4)， 涕灭威亚砜(CAS:1646-87-3)。
三、应用范围
本方法适用于生姜、大米、花生等样品中涕灭威、涕灭威砜及涕灭威亚砜 LC-MS/MS检测及确证。
四、参考标准
《SN/T 2441-2010 进出口食品中涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法》
五、实验材料
NuAnalytical SuperClean NH2 固相萃取柱 500 mg/3 mL。
六、实验方法
1、 样品待测溶液制备
称取 5.0 g 生姜试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 离心管中，加入 20 ｍL 乙腈，均质 2 min，振荡提取 20 min，上清液过无水硫酸钠收集到分液漏斗中，残渣再加入 20 mL 乙腈，重复上述操作一次，合并 2 次滤液，加入 20 mL 用乙腈饱和的正己烷，振荡 10 min，静置分层，弃去正己烷层，乙腈层于 40 ℃下旋转蒸发浓缩至干，用 2 mL 甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)溶解， 待净化。
2、活化
5mL 甲醇-二氯甲烷(1:99, v/v)活化，弃去流出液。
3、上样和洗脱
加入待净化液，流速控制在 1 mL/min 内，收集流出液，用 5 mL 甲醇-二氯甲烷(1:99,v/v)洗脱，接收流出液，并重复一次，合并前后两步的流出液。
4、重新溶解
40 ℃缓慢氮气流条件下吹至近干(约 0.5 mL)后挥干，用 1.0 mL 乙腈-0.1%甲酸水溶液(10:90,v/v)定容至 1 mL，过 0.45µm 微孔滤膜，供 LC-MS/MS 测定。
5、LC-MS/MS 条件
质谱仪：API 4000
色谱柱：SuperLu C18(2.0 mm×150 mm, 5 μm)
流动相：A: 乙腈 B: 0.05%甲酸水溶液
洗脱方式：梯度洗脱，洗脱程序如下：
时间/min
A(%)
B(%)
0.00
10
90
1.50
10
90
4.00
100
0
8.00
100
0
8.01
10
90
13.00
10
90
流速：0.3 mL/min
柱温： 30 ℃
进样体积：5 μL
离子源：电喷雾(ESI)
扫描模式：正离子模式
检测方式：多反应监测(MRM) 质谱仪离子源参数如下：
Source/Gas
Collision Gas (CAD)
6
Curtain Gas (CUR)
30
Ion Source Gas 1 (GS1)
50
Ion Source Gas 2 (GS2)
50
Ion Spray Voltage (IS)
5500
Temperature (TEM)
600
Interface Heater (IHE)
ON
涕灭威、涕灭威砜及涕灭威亚砜的母离子和子离子参数表：
物质名称
保留时间/min
检测离子对
DP
EP
CE
CXP
涕灭威
7.47
208.1/89.1
208.1/116.0
30
30
10
10
22
10
12
12
涕灭威砜
5.40
207.1/132.2
207.1/89.1
60
60
10
10
13
22
12
12
涕灭威亚砜
2.86
223.1/86.2
223.1/148.1
60
60
10
10
21
13
12
12
七、实验结果
1、生姜基质 10 µg/kg 加标回收结果
表 1 生姜中 10 µg/kg 加标回收实验结果
回收率（%）
|
名称 |
1 |
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
涕灭威 |
89.23 |
96.74 |
92.86 |
92.94 |
4.05 |
|
涕灭威砜 |
94.65 |
86.96 |
92.35 |
91.32 |
4.33 |
|
涕灭威亚砜 |
94.63 |
93.26 |
89.98 |
92.62 |
2.58 |
2、添加水平为 10 µg/kg 生姜基质中涕灭威及其代谢物检测的色谱图
图 1 涕灭威及其代谢物总离子流图 图 2 涕灭威(Aldicarb)(208.1/89.1)质谱图
图 3 涕灭威砜(Aldicarb S)(223.1/86.2)质谱图 图 4 涕灭威亚砜(Aldicarb Sulfone)(207.1/132.2)质谱图
