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水产品中喹乙醇检测的固相萃取方法
（PolyClean X- HLB）
一、实验目的
本研究利用固相萃取作为样品前处理方法，HPLC作为分析方法，检测水产品样品中的喹乙醇的残留水平。该方法操作简便，可简化样品前处理过程，减少有机溶剂的使用。
二、实验目标物
喹乙醇(CAS:23696-28-8)
三、应用范围
本方法适用于水产品中喹乙醇的检测的HPLC检测及确证。
四、参考标准
《GB/T 8381.7-2009饲料中喹乙醇的测定 高效液相色谱法》
五、实验材料
NuAnalytical PolyClean X-HLB固相萃取柱60mg/3mL。六、实验方法
1、 样品待测溶液制备
准确称取5 g匀浆鱼肉试样(精确到0.001 g)于50 mL具塞塑料离心管中，加入35 mL甲醇-水溶液(5:95,v/v)，离心管置入摇床中，室温下恒温振荡器振荡速度110 r/min，避光振荡45min。提取液在3500 r/min下离心10min，上清液经滤纸过滤，滤液加入10 mL正己烷，充分混匀后，以5000 r/min离心10 min，弃取上层溶液，下层溶液待净化。
2、活化
依次用3 mL甲醇和3 mL水活化。
3、上样和洗脱
将待净化液的样品清液加入已活化好的固相萃取柱中，以1 mL/min的流速过柱，弃去滤液。依次用3 mL 0.02 mol/L盐酸溶液、0.1 mol/L盐酸溶液、甲醇-水溶液(5:95, v/v)淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中残留液。用5 mL甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。
4、重新溶解
洗脱液于40 ℃氮气吹干，用2 mL甲醇定容，0.22 μm微孔滤膜过滤，供HPLC测定。
5、HPLC条件
色谱柱：SuperLu C18 (250×4.6mm，5μm)
检测器：UV@380 nm
流动相：A：甲醇 B：0.1mol/L甲酸水溶液
柱温：室温
流速：1.0mL/min
进样量：20μL
洗脱方式：梯度洗脱，梯度条件如下：
|
时间/min |
A/% |
B/% |
|
0 |
15 |
85 |
|
3 |
15 |
85 |
|
7 |
70 |
30 |
|
12 |
70 |
30 |
|
16 |
15 |
85 |
|
20 |
15 |
85 |
七、实验结果
1、鱼肉基质中喹乙醇的2mg/kg添加回收结果
|
名称 |
回收率（%） |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
||
|
1 |
2 |
3 |
|||
|
喹乙醇 |
90.3 |
88.7 |
85.5 |
88.1 |
2.77 |
2、添加水平为2mg/kg鱼肉基质中喹乙醇检测色谱图
图1 添加水平为2mg/kg鱼肉基质中喹乙醇检测色谱图
