SuperLu Amino 柱反相条件下分析还原糖的操作与再生维护建议
还原糖(乳糖、盐酸氨基葡萄糖、阿卡波糖等)在用 SuperLu Amino 柱分析时,容易与固定相发生反应(所有氨基柱的共同特点),也容易因硅胶表面质子存在而影响峰形。
因此,在分析这类糖时,在新柱启用以及旧柱每次使用前,细致的处理有利于获得好的结果,步骤如下(特别重要):
1. 乙腈:水=70:30,1ml/min 流速,冲洗 40-60 分钟; 2. 乙腈:水=70:30,并添加 0.1%的氨水(浓度约 32%),1ml/min 流速,冲洗 80-100 分钟; 3. 乙腈:水=70:30,1ml/min 流速,冲洗 40-60 分钟;
以上操作可去除硅胶表面质子以获得糖类好的峰形并适当补充氨基。它同时适合非还原性糖分析时出现的可能峰形问题。
SuperLu Amino 因氨基损失而柱效下降,可以通过以下操作尝试再生:
1.PH=10.5 的氨水 0.6ml/min 冲洗 1 小时; 2.乙腈:水=70:30,1ml/min 流速,冲洗 30 分钟; 3.100%异丙醇冲洗 20 分钟,冲洗后可直接保存;
附:如果条件允许更改方法不用氨基柱的话,推荐以下案例,采用 Comixsil HCS 柱分析盐酸氨基葡萄糖,硫酸氨基葡萄糖,解决寿命与重现上的问题。 色谱柱:Comixsil HCS 3u 100*4.6mm(货号:FMD-HCS3-EONU) 柱温:30 度 流速;1.0ml/min 流动相: 乙腈:100mM 乙酸铵(pH5.0)=60:40 检测器: ELSD
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