液相色谱中“堵”和“漏”是两大常见问题,针对这两个问题,可以采取以下措施进行解决:
### 一、解决“堵”的问题
#### 1. 识别堵塞原因
液相色谱仪“堵”的表现现象是柱压异常升高,主要原因是流路不畅。堵塞的主要位置在色谱柱的前端,而堵塞的主要来源是流动相中的杂质,尤其是细菌污染。
#### 2. 预防措施
* **确保水质**:配制流动相时,应使用高质量的水。可以购买实验室专用纯水机,或选择市售品牌纯净水,如怡宝、娃哈哈等,并确保其细菌含量合格。
* **避免细菌污染**:新制备的纯水在室内放置几天就会长菌,因此建议每次实验使用新制备的纯水,并在实验结束后及时更换流动相,用甲醇等有机溶剂冲洗干净。
* **减少流动相过滤**:虽然理论上流动相过滤有助于去除杂质,但实际操作中容易造成交叉污染,且经济成本和时间成本较高。在保证水质的前提下,可以省略过滤步骤。
#### 3. 清理堵塞
* **更换零件时注意型号匹配**:在更换零件时,应选择型号匹配的零件,避免接口不匹配造成管路堵塞。
* **定期检查和维护**:定期检查液相色谱仪的各个部件,特别是色谱柱、六通阀等易堵塞部位,确保其清洁无堵塞。
* **使用合适的工具和方法**:在清理堵塞时,可以使用适当的工具和方法,如逆向分段拆开系统、更换堵塞部件等。
### 二、解决“漏”的问题
#### 1. 识别漏液原因
液相色谱仪的流路是一个全封闭体系,如果某个部件发生漏液,那就是故障所在。漏液的原因主要有两种:接触硬件不当和使用仪器不当。
#### 2. 预防措施
* **选择合适的接头和接口**:在更换零件时,应选择合适的接头和接口,并确保其匹配度良好。选用PEEK接头是一个较好的解决方案,因其通用性好且靠手拧就能保证不漏液。
* **注意操作力度**:在拧紧接头时,要注意力度适中,避免拧得太紧或太松导致漏液或滑丝。
* **定期维护和检查**:定期检查液相色谱仪的各个部件,特别是接头、接口等易漏液部位,确保其密封性良好。
#### 3. 处理漏液
* **及时维修**:一旦发现漏液现象,应立即停机检查并维修。根据漏液原因采取相应的维修措施,如更换接头、调整接口等。
* **避免进一步损坏**:在处理漏液时,要注意避免进一步损坏液相色谱仪的其他部件。例如,在清理漏液时,应避免使用腐蚀性强的溶剂或工具。
综上所述,解决液相色谱中“堵”和“漏”的问题需要从多个方面入手,包括预防、识别原因、清理堵塞和处理漏液等。通过采取有效的措施,可以确保液相色谱仪的正常运行和实验结果的准确性。