γ-氨基丁酸

γ-氨基丁酸

γ-氨基丁酸（又称4-氨基丁酸，GABA）是一种天然存在的非蛋白质功能性氨基酸，参与人体中多种代谢活动，具有很多重要的生理活性功能。GABA能抑制交感神经系统的兴奋，有助于改善睡眠、镇静和防焦虑。GABA在胰岛β细胞内可增加胰岛素分泌，作用于胰岛α细胞可抑制胰高血糖素分泌，在预防和治疗糖尿病上有潜在应用。GABA可以促进脑细胞的新陈代谢，帮助脑细胞恢复功能，增强长期记忆。此外，GABA还具有抗高血压、抗氧化、缓解压力、抗肿瘤等健康益处。

由于其健康属性，GABA的检测受到学术界的广泛关注。现有文献报道GABA的检测方法主要有液相色谱法、Berthelot比色法、气相色谱-质谱法等。液相色谱法一般使用紫外-可见光或荧光检测器，氨基酸需要在柱前或柱后进行衍生反应生成有色物质，是目前氨基酸分析中应用最多的方法。今天菲罗门就γ-氨基丁酸的检测知识为大家详细的说明一下。

一、衍生法方法：根据国标QB/T 5633.7-2022 第七部分：γ-氨基丁酸，紫外检测法

原理：氨基酸与2,4-二硝基氟苯进行定量衍生反应，生成在360nm处有较强在外吸收的稳定衍生物。

色谱柱：菲罗门核壳柱FastCore C18-AQ 5u 250*4.6mm（货号：FSG-5AC18-EONU）

流动相：A相：称取4.1g乙酸钠，加纯化水使其溶解，加入60uL冰乙酸，定容到1000mL，抽滤

B相：纯乙腈    

梯度洗脱程序见右表                                        

流速：0.8 mL/min           

检测波长：360nm

柱温：（35±5）℃                          

进样量：10ul

图一：FastCore C18-AQ 5u 250*4.6mm检测结果图

注明：8.094minγ-氨基丁酸，客户评价：这款色谱柱，是核壳色谱柱，柱效高于常规硅胶色谱柱，峰形对称，同时减少检测时间增加检测效率。

近年来，越来越多研究人员希望采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定食品中GABA。LC-MS/MS具有操作简单快捷、定性定量准确、灵敏度高等优点，所以菲罗门开发适用于质谱条件的检测方法。

1. 不衍生直接检测法，适用于ELSD，CAD, LC-MS

    

   色谱柱 1：Comixsil RP-100 5 μm 100×3.0 mm（货号：FMD-100R5-YONU）

   流动相 1：ACN:水：20mM (pH=3)甲酸铵=10：80：10

1. 氯离子 2. 瓜氨酸 3. 4-氨基丁酸（GABA） 4. 鸟氨酸 5. 多巴胺 6. 精氨酸

    

    

    

   色谱柱 2：Comixsil HCS 3 μm 100×3.0 mm（货号：FMD-HCS3-YONU）

   流动相 2：乙腈：200 mM 甲酸铵 (pH 3)=72:28

2. 氯离子 2. 瓜氨酸 3. 4-氨基丁酸（GABA） 4. 鸟氨酸 5. 多巴胺 6. 精氨酸

    

    

    

    

   色谱柱3：Comixsil HAC 3u 100*3.0mm (P/N: FMD-HAC3-YONU)

   流动相3：A：乙腈 B：100mM 甲酸铵 pH 3 C：水 D：1% 甲酸

    

    

    

    

    

   食品中GABA可能的生成途径有两条：第一条是谷氨酸脱羧酶及其辅助因子磷酸吡哆醛催化谷氨酸或其盐脱羧合成，称为GABA支路；第二条途径是由二胺氧化酶和多胺氧化酶降解多胺（腐胺、精胺、亚精胺）形成多胺中间产物，多胺中间产物在脱氢酶的催化下形成GABA。

    

    

   三、γ-氨基丁酸生成途径中里面涉及的谷氨酸和多胺化合物相关案例。

1. 多胺化合物（腐胺、精胺、亚精胺），同时适用于质谱条件。

   色谱柱：Titank F5 5μm 150×4.6mm（货号：FMF-5565-EONU）

   流动相：甲醇/水（30/70），含 10mM 甲酸

   流速：1.0ml/min

   进样体积：1μL（25μg/mL）

   检测：CAD

   温度：25℃

    

    

    

2. 谷氨酸

   色谱柱：Comixsil HCS 5µ 250*4.6mm（货号：FMG-HCS5-EONU )

   流动相：乙腈：50mM 磷酸氢二铵（pH 6.0）=60:40

    

    

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