流动相是色谱过程中携带待测组分向前移动的物质,与固定相处于平衡状态,带动样品向前移动。流动相的类型多样,按组成可分为单组分流动相和多组分流动相;按极性可分为极性流动相、弱极性流动相和非极性流动相;按作用可分为底剂和洗脱剂;按使用方式可分为等度流动相和梯度流动相;按用途可分为己烷、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈和水等。
流动相的特性主要包括以下几点:
1. 流动相应具有一定的溶解能力,以确保样品组分不会沉淀在柱中或长时间保留在柱中。
2. 流动相与样品之间不应产生化学反应。
3. 流动相的黏度应尽量小,以便获得好的分离效果,降低柱压降,延长泵的使用寿命。
4. 流动相的物化性质应与使用的检测器相适应,例如使用UV检测器时,应使用对紫外吸收较低的溶剂配制。
在选择流动相时,需要考虑以下几个标准:
1. 流动相应不改变填料的任何性质,以避免影响色谱柱填床的性质。
2. 流动相的纯度要高,因为色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。
3. 流动相必须与检测器匹配,以保证检测结果的准确性。
在优化流动相时,需要考虑以下几个方面:
1. 溶解度优化:优化流动相组成需要兼顾溶解度和色谱效果的平衡。
2. 混合比优化:通过试错法,对不同比例的混合液进行实验,找到最优化的组成比例。
3. 温度优化:在一定温度下进行分析,可以增加物质的溶解度,降低流动相的粘度,从而缩短分析时间。
4. 酸碱性优化:选择合适的酸碱性条件可以提高分析效果。
综上所述,流动相在色谱分析中扮演着至关重要的角色,其类型、特性和选择标准对于实验结果的准确性和可靠性具有重要影响。通过合理的选择和优化技术,可以确保色谱分析的有效性和准确性。