液相色谱分析条件的筛选要点主要包括以下几个方面:
1. 确定目标化合物的性质:需要了解待分离杂质的一些性质,如分子量、结构式等,以及该物质在何种有机溶剂中易溶。结构式对于分子极性大小的预测以及判定该物质是否容易水解有重要作用。
2. 确定正反相洗脱方式:洗脱方式的选择会影响分离效果。常见的洗脱分离方式为反相分离,而反相洗脱方式又分为两种体系,一种是甲醇-水体系,另外一种是乙腈-水体系。具体是选择哪种反相洗脱体系需要根据以下条件来决定:乙腈的洗脱能力要优于甲醇,同等浓度、样品下乙腈-水体系的目标峰出峰要快于甲醇-水体系;甲醇溶于水会放出热量,而乙腈溶于水会吸热,同等方式的梯度洗脱方式下,甲醇溶于水时分子热运动更剧烈,基线更平滑,梯度峰更少;甲醇在市面上的售价要低于乙腈。
3. 选择色谱柱:在选择色谱柱时,需要考虑分析物的性质和所需分离度。选择正确的色谱柱可以提高分离效率和分离度,从而提高分析准确性。
4. 选择流动相:流动相的选择要基于分析物的性质和所需分离度。不同的流动相可以影响分离的选择性、效率和重复性。
5. 确定柱温:柱温可以影响分析物的分离和保留行为。某些化合物需要较高的温度才能分离得到,而对于其他化合物而言,则需要较低的温度。
6. 确定流速:流速通常会影响分离效率和分离度。选择正确的流速可以获得最佳分离效果。
以上是液相色谱分析条件筛选的要点,可以根据实际情况进行调整优化。