HILIC模式色谱柱的原理是基于吸附色谱的分离方式,利用固定相的极性吸附作用和流动相的洗脱作用实现样品的分离。HILIC模式色谱柱的固定相通常为极性填料,如硅胶或聚合物,表面含有亲水基团和疏水基团。流动相则通常为高极性的有机溶剂,如甲醇、乙腈等,用于携带样品通过色谱柱进行分离。
在分离过程中,样品中的化合物首先在流动相和固定相之间进行分配,极性分子首先在主体流动相与色谱填料表面的半固定的高极性水膜之间发生液液分配。次级保留作用包括色谱填料表面硅醇基和/或极性官能团与带电分析物发生的离子交换作用。此外,氢键作用也发生在带正电的分析物与带负电的表面硅醇基之间。
对于HILIC模式色谱柱的维护,需要注意以下几点:
1. 避免使用磷酸盐等强酸性添加剂,以免对色谱柱造成损害。
2. 在使用前,应进行色谱柱的平衡和清洗,确保色谱柱在使用前已经稳定且清洁。
3. 在使用过程中,应注意控制流速和流动相的比例,避免对色谱柱造成过大的压力或流量波动。
4. 在使用结束后,应对色谱柱进行清洗和保存,避免样品在色谱柱中残留或产生污染。
总之,正确使用和维护HILIC模式色谱柱可以延长其使用寿命,提高分离效果和实验结果的可靠性。