保护柱的选择和使用指南如下:
1. 根据分析柱的填料品牌选择保护柱,要与分析柱保持一致,以保证选择性一致。
2. 根据分析柱的规格选择匹配的保护柱,填料粒径与分析柱的粒径相近,保护柱的内径与分析柱的内径相近。
3. 对于精细分离,保护柱本身的装填柱效要足够好,以降低峰扩散,提高分离度。
4. 对于精细分离或者小内径色谱柱分离,保护柱的连接死体积要尽可能小。
5. 如果是用于UHPLC柱,还要考虑保护柱的耐压能力。
在使用保护柱的过程中,需注意以下几点:
1. 专柱专用,避免保护柱成为不同项目的交叉污染源。
2. 当峰的理论塔板数下降15%,或是柱压上升15%,或是关键分离度下降15%时,应及时更换保护柱。
3. 不慎发生强污染时,可以将分析柱卸下,单独冲洗保护柱,可以使污染物更快的从保护柱中流出。但不可以超声保护柱。
4. 在连接保护柱时,要尽可能缩短连接管路,减少死体积,降低柱外展宽效应。
5. 如同一保护柱配不同的分析柱使用,每次使用前,保护柱需先清洗并用流动相平衡保护柱一段时间后,再接分析柱使用。