当色谱柱堵塞并且压力很高时,可以采取以下几步来尝试解决问题:
1. 检查和确认进样口和柱子之间是否有气泡。如果有气泡存在,可能会导致良好的进样流动受阻。检查连接和连接件,确保没有松动或泄漏。
2. 检查进样量是否超过了柱子承受的最大载样量。如果加载样量过多,可能会导致柱子堵塞。适当减少样品的进样量。
3. 尝试清洗柱子。可以使用适当的溶剂或洗涤剂来清洗柱子。温和的溶剂,如甲醇、醋酸乙酯或水,可以用于清洗。根据需要,可以尝试增加洗涤液的流速或使用多次洗涤。
4. 尝试改变洗涤液的成分。根据堵塞的可能成因,可以选择使用不同的洗涤剂或溶剂来清洗柱子。例如,有时使用pH调节剂、氨水或酸性溶液来改变洗涤液的pH值可能会有帮助。
5. 如果上述方法都无效,可以采取更强力的方法,如使用更浓的洗涤液或聚合物溶液进行冲洗,或者尝试进行逆向流动冲洗。但是,在进行这些操作之前,请确保柱子和系统能够承受更高的压力和更强的冲洗溶剂。
如果上述方法都没有解决问题,那么可能需要更换色谱柱。