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- 中国药典氨基酸分析柱 Mercury AA 菲罗门Mercury系列专用液相色谱柱特别针对《中国药典》而开发,完美地符合药典对于柱效、分离度、相对保留时间和对称因子等参数的各项要求,并且具有良好的质量稳定性和高度的批间重现性,从而可帮助制药企业对药品质量进行有效监控。
菲罗门Mercury系列专用液相色谱柱特别针对《中国药典》而开发,完美地符合药典对于柱效、分离度、相对保留时间和对称因子等参数的各项要求,并且具有良好的质量稳定性和高度的批间重现性,从而可帮助制药企业对药品质量进行有效监控。
Mercury AA 氨基酸分析柱
特点:
* Mercury AA ( 氨基酸分析) 色谱柱专为分离与分析游离氨基酸而设计,以硅胶基质反相固定相材料为填料。
* Mercury AA 固定相以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质,采用高纯度键合试剂,通过创新独有的技术确保最大单分子层覆盖和全封尾。
高度可控的单分子层形成和封尾技术保证了可靠的柱间重现性。
* Mercury AA 表面覆盖率已达到最大化,因此具有优异的稳定性。
该填料为均一的球形颗粒,孔径为120 Å,比表面积为 300 m2/g。
通过运用独有的匀浆填装技术装填得到的 Mercury AA 柱柱床密度均一稳定,因此可保证具有最高的柱效。
通过 PITC 衍生化方法,18 种氨基酸可在Mercury AA 柱获得高分辨率的快速分析。
注意事项:
新的 Mercury AA 柱是置于高有机水溶液中运输的,在储存和运输过程中,硅胶填料可能会干涸。
这时推荐用10-20 倍柱体积的纯有机溶剂如甲醇、乙腈进行冲洗以活化色谱柱。
接着可用用户自己选择的流动相冲洗色谱柱。流速由0.1mL/min 逐渐升至所需的操作条件,直至基线稳定为止。
如果柱压和基线波动较大,这可能是气泡进入了色谱柱中。
这时可用较高流速冲洗色谱柱 2-5 分钟,例如对于 4.6x250mm 的色谱柱可采用流速1.5 mL/min。
pH 为了获得最佳的分离效果和延长柱的使用寿命,请尽量使用 pH 在 3 - 7.5 范围内的流动相。
压力 尽管 Mercury AA 柱可在高至 5000 psi 的压力下使用,但正常的操作压力应当低于 3000 psi。
温度 最高操作温度为 60℃。
储藏 长期不用时,保存在纯有机溶剂如乙腈
供货信息:
货号 |
描述 |
规格 |
包装 |
FMG-AAAA-EONU |
Mercury 5u AA |
250*4.6mm |
Ea |
氨基酸分析步骤
1. 原理
这种分析氨基酸的方法基于柱前衍生步骤,衍生化反应是在碱性条件下完成的,采用异硫氰酸苯酯和游离氨基酸反应生成的 PTC- 氨基酸衍生物可于 UV 254 nm 处被检测到。
通过PITC 衍生法改善的氨基酸分离同样使其分析更有效。
2. 试剂
三乙胺溶液: 将 1.4 mL 三乙胺和 8.6 mL 乙腈混和均匀。异硫氰酸苯酯溶液:配成 12.5 μL/mL 的异硫氰酸苯酯的乙腈溶液。
18 种氨基酸标准溶液:溶解或稀释一定量的 18 种氨基酸于0.1 mol/L 盐酸中, 配制成 0.5 μmol/mL18 种氨基酸标准溶液。
醋酸钠溶液:将 16.4 g 无水醋酸钠溶解于 2.0 L 水中,配制成0.1 mol/L 的醋酸钠溶液,用冰醋酸调节 pH到 6.5。
3. 衍生化反应
转移 200 μL 18 种氨基酸标准溶液(或样品溶液)放入1.5mL 塑料管中, 加入 100 μL 三乙胺溶液和 100μL 异硫氰酸苯酯溶液,混合,至于室温下反应 1h 后,加入 400 μL 正己烷,涡旋振荡 10min。
取下后用 0.45μm 滤膜过滤后进样。
4. 液相色谱分析
色谱柱: Mercury AA 5u 250*4.6mm (FMG-AAAA-EONU)
流速: 1.0 mL/min
温度: 36℃
检测: UV 254 nm
进样量: 5 μL
流动相 A: 0.1 mol/L 醋酸钠,pH 6.5 : 乙腈 = 93 : 7 (v/v)
流动相 B: 乙腈 : 水 = 80 : 20 (v/v)