App ID: FLM-C210052
亚甲基二磷酸的HPLC保留和峰形调节
方法:自定
色谱柱:Comixsil HAX 3µ 100*4.6mm(货号:FMD-HAX3-EONU )
流速:1.0 mL/min
检测:ELSD,45℃,2.5 L/min
柱温:30 ℃
流动相:A(H2O):B(ACN):C(1% TFA)
流动相1:
T/min |
A(H2O)% |
B(ACN)% |
C(1% TFA)% |
|
75 |
20 |
5 |
流动相2:
T/min |
A(H2O)% |
B(ACN)% |
C(1% TFA)% |
|
70 |
20 |
10 |
流动相3:
T/min |
A(H2O)% |
B(ACN)% |
C(1% TFA)% |
|
60 |
20 |
20 |
流动相4:
T/min |
A(H2O)% |
B(ACN)% |
C(1% TFA)% |
0-10 |
75-60 |
20 |
5-20 |
流动相5:
T/min |
A(H2O)% |
B(ACN)% |
C(1% TFA)% |
0-5 |
75-60 |
20 |
5-20 |
图片数据:
流动相条件 |
保留时间 |
柱效 |
拖尾因子 |
流动相 1 |
10.743min |
2405 |
0.693 |
流动相 2 |
3.636min |
1543 |
0.793 |
流动相 3 |
1.920min |
1664 |
1.242 |
流动相 4 |
5.982min |
5097 |
0.831 |
流动相 5 |
5.086min |
6097 |
0.905 |
方法开发说明:
本实验选择 Comixsil HAX 这款阴离子交换+HILIC 作用混合模式色谱柱,在阴离子交换模式下,考察了不同浓度的酸以及酸梯度下对亚甲基二磷酸的保留和峰形的影响。亚甲基二磷酸的保留对酸的浓度比较敏感, 实验表明,当使用酸的梯度时,可以改善其峰形,且缩短梯度时间时,可以进一步改善峰形。这在混合模式方法开发中是非常普遍的改善峰形的方式,谨以此应用数据供使用者参考。