婴幼儿配方奶粉中核苷酸含量测定
婴幼儿奶粉中核苷酸的检测
样品制备：
精密称取奶粉 5.0 g，加适量温水，超声 10 min 使溶解，加 10%醋酸溶液 5 mL，摇匀，静置，再加水定容至 50 mL，摇匀，过滤，取上清液待用。
样品净化：
SPE 小柱：Polyclean X-HLB 60mg/3mL（货号：9B-P001-06030）
活化：甲醇 3 mL
平衡：水 3 mL
上样：2 mL 待净化液
冲洗：20%甲醇/水溶液 3 mL
合并上样流出液与冲洗流出液，再加水定容至 5 mL，作为待测溶液。
HPLC 测定：
色谱柱：Titank C18 5μm 250×4.6mm （货号： FMG-5560-EONU）
流动相：0.1 M K2HPO4 溶液（用磷酸调节 pH 值至 5.6）为流动相A；乙腈为流动相B
流 速 ：1 mL/min
进样体积：5 μL
检测波长：260 nm
温度：常温
梯度：
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时间(分钟) |
流动相 A(%) |
流动相 B(%) |
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0 |
100 |
0 |
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8 |
100 |
0 |
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25 |
95 |
5 |
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27 |
75 |
25 |
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40 |
75 |
25 |
5 种核苷酸混标图谱
Polyclean X-HLB 净化后婴儿配方奶粉图谱
