Chiral AAOA 手性柱使用说明
·色谱柱信息
Chiral AAOA 手性柱是以高纯度具有良好机械稳定性的硅胶为基质,通过键合 D-青霉胺于十八烷基柱上而成的配体交换型手性柱。
该系列手性柱专属用于手性拆分脂肪族,芳香族的α型有机酸、α型非衍生氨基酸及其衍生物、二元胺、二肽、内酰胺、氨基醇等。
·色谱柱安装与操作注意
新的 Chiral AAOA 系列手性柱保存在 5%异丙醇:95%的 2mM 硫酸铜水溶液中。使用前务必用流动相完全清洗管路后,再接色谱柱冲洗平衡 1 小时以上再进样。
该系列手性柱的推荐流动相为 2mM 的硫酸铜水溶液:异丙醇=95:5(V/V)。流动相中异丙醇的比例不能超过 15%,过大比例会导致色谱柱的损坏。
·样品与流动相
为了避免色谱柱的堵塞,所有样品和溶剂,都必须在使用前用 0.45 m 或 0.22 m 的滤膜过滤。
建议可采用保护柱套(FCG-6000)和保护柱芯(FCG-6287)以拦截污染物和意外的盐析。
流动相中任何时候不能含有无机酸,无机碱,不可用不含铜离子的盐,否则将损坏色谱柱。
流动相一定要采用预混合方式走等度,在线混合方式将损坏色谱柱。样品一定要用水或流动相溶解。
流动相中硫酸铜的浓度发生变化时或体系发生变化时,色谱柱要重新平衡 2 小时以上。
方法开法过程中的建议(按程序进行)
1. 异丙醇比例可向下调节至 0(将增加保留时间,分离度可能提升)或向上调节至最大 15%(将减小保留时间,分离度可能降低);
2. 可用乙腈(最高比例不超过15%)或甲醇(最高比例不超过30%)取代流动相中的有机成份异丙醇;
3. 温度可调节的范围为5-60 ℃;
4. 硫酸铜的浓度控制在 0.5mM 至 4mM 之间,一般使用为 2mM。注意随着盐浓度的增加,有机相的最高比例限会降低;
5. 可用0.5mM 醋酸铜+0.1M 的醋酸铵水溶液体系直接取代硫酸铜与异丙醇体系(pH 也可通过用醋酸或氨水调整在 4.5-7 之间);
色谱柱的保养
pH 避免在pH 低于 4.0 或高于 7.0 的条件下使用色谱柱。请尽量使用pH 在 4.5‐7.0 范围内的流动相。
压力 操作压力要低于200 bar(或20MPa 或 2900Psi)。
温度 最高操作温度为60 C。尽量在50 C 以下使用。色谱柱必须在柱温箱严格控温下操作。
储藏 每日用完时,务必用 5%异丙醇:95%的 2mM 硫酸铜水溶液以 0.5ml/min 流速冲洗 2 小时以上,并直接常温保存。如果色谱柱长期不用,每隔 6 个月,需要用此流动相重新冲洗 2 小时以上再保存。