氨基酸分析法汇总
概览
⼀、认识氨基酸
⼆、氨基酸的应⽤⾯
三、氨基酸分析⽅法的分类介绍
一、认识氨基酸
氨基酸（aminoacid）：含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。是含有 碱性氨基和酸性羧基的有机化合物。氨基连在α-碳上的为α-氨基酸。组成蛋白质的氨基酸均为α-氨基酸。
科学家们已经发现天然的氨基酸有300种，其中基本氨基酸有二十个品种，比较常见的氨基酸有苏氨酸、赖氨酸、亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、色氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸8种氨基酸，人体不能够自己制造的氨基酸，我们称为必
须氨基酸，因此，需要由食物来提供。氨基酸是构成蛋白质的基本单位，赋予了蛋白质特定的分子结构形态，使蛋白质子具有生化活性。蛋白质它是生物体内最重要的活性分子之一，包括催化代谢的酶。
下图为α-氨基酸的通式，生命体蛋白质就是由上图中的20种基本α-氨基酸构 成的。在这些氨基酸中，除了甘氨酸（R＝H）外，其它19种均为手性氨基 酸。即都有D，L构型。
我们在合成生物药（多肽类）时，采用的基本单元即这20种氨基酸。
二、氨基酸的应用面
氨基酸的应用面十分广泛。结合我们分析领域常见的情况，总的来说有以下几个方面：
1、作为必要营养的摄入－－－营养品，饮料，奶粉等
2、作为疾病治疗的直接补充－－－大输液、针剂等
3、作为生物药的基本单元－－－多肽，蛋白类药物
4、作为某种表征－－－身理缺陷，基因缺陷
三、氨基酸分析方法的分类介绍
1、⾮⼿性氨基酸的分析⽅法介绍
2、手性氨基酸的分析方法介绍
(1）、HPLC-UV法（此法都需要对氨基酸进行衍生）
(2)、HPLC-ELSD或RID法（此法不需要对氨基酸进⾏衍⽣）
(3）、HPLC（或UPLC）-MS法（此法不需要对氨基酸 进行衍生）
A、HPLC－UV PITC衍生分析法案例18种氨基酸
B、HPLC-UV OPA和FMOC衍生分析法 案例32种氨基酸
供货信息: FMF-5560-E0 Titank C18 5u 150*4.6mm
C、 HPLC-UV DNFB 衍生分析法 案例
⽬前较多客户使⽤，⽤于药典中制剂18种氨基酸的分析，非常容易分析以下色谱柱推荐解决⾊谱柱供货信息：
A．FMG-5560-EONU Titank C18 5u 250*4.6mm
B. FMG-5292-EONU SuperLu C18(2) 5u 250*4.6mm
(2)、HPLC-ELSD/CAD/UV法（此法不需要对氨基酸进⾏衍⽣）
A.Comixsil HCS 对１８种氨基酸的分析-ELSD
Comixsil CARP智能柱对16种非衍生氨基酸的分析-UV
Comixsil HCS智能柱对赖氨酸和精氨酸的分析----UV检测器
Comixsil RP-100智能柱对20种氨基酸的分析
(2)、HPLC-UV法-适合某些氨基酸（此法不需要对氨基酸进⾏衍⽣）
推荐SuperLu C18- AQ这类大极性柱
SuperLu C18 AQ对异亮氨酸与亮氨酸的分析UV检测器
色谱柱：SuperLuC18-AQ5u250*4.6mm
流动相：索取
流速：1.0mL/min，
进样量：10ul
检测波长：210nm
（3）、HPLC（或UPLC）-MS法（此法不需要对氨基酸进⾏衍⽣）
SuperLu C18-AQ柱推荐（1.8u,3u 100*2.1mm)
2、⼿性氨基酸的分析⽅法介绍
（1）、阿尔法（ɑ）型游离手性氨基酸拆分
（2）、FMOC或BOC等保护型手性氨基酸的拆分
（1）、阿尔法（ɑ）型游离手性氨基酸拆分推荐用柱：
Chiral AAOA 3u 50*4.6mm(FMB-AAOA3-EONU)
或Chiral AAOA 5u 150*4.6mm(FMF-AAOA-EONU)
（2）、FMOC或BOC等保护型各类手性氨基酸的拆分
保护型的各类氨基酸，全部可以在某种多糖型手性柱中实现手性拆分。推荐的一套
手性柱的供货信息如下：
涂敷型一套(正相，成功率最高）
A、FMG-AC5-A01-NFC Chiral ND(2) 5u 250*4.6mm;
B、FMG-AC5-B01-NFC Chiral MD(2) 5u 250*4.6mm;
C、 FMG-AC5-B02-NFC Chiral MZ(2) 5u 250*4.6mm;
D、FMG-AC5-B03-NFC Chiral MJ(2) 5u 250*4.6mm;
涂敷型一套(反相，成功率没有反相高，但也不错，适合只想要反相条件的客户）
A、FMG-AC5-A01-Ｒ Chiral ND(2)-RH 5u 250*4.6mm;
B、FMG-AC5-B01-R Chiral MD(2)-RH 5u 250*4.6mm;
C、 FMG-AC5-B02-R Chiral MZ(2)-RH 5u 250*4.6mm;
D、FMG-AC5-B03-R Chiral MJ(2)-RH 5u 250*4.6mm;
或者键合型一套
A、FMG-JY5-I01 Chiral INA 5u 250*4.6mm;
B、FMG-JY5-I02 Chiral INB 5u 250*4.6mm；
C、FMG-JY5-I03 Chiral INC 5u 250*4.6mm
以上手性柱拆分保护型氨基酸的起始流动相建议：
正相体系中一般的流动相条件是：0.1%的甲酸加入到80:20的正己烷：异丙醇中；
反相体系中一般的流动相条件是：0.1%的TFA加入到40：60的水：乙腈的体系中；
