液相色谱技术在基因杂质分析中的重要作用
高效液相色谱技术(HPLC) HPLC 作为最传统的方法在杂质分离中仍然使用得最多。
通过各种色谱柱技术以及联用技术能够对绝大多数化合物实现分离、分析。
为了解决与紫外检测器联用灵敏度低的问题，新型二维 高 效 液 相 色 谱 (2D-HPLC)利用了液相色谱技术分离和富集的特点提高了对低浓度杂质的检测能力。
目前，HPLC 无论采用正相洗脱还是反相洗脱都需消耗大量的有机溶剂，这对环境带来较大的污染，因此提出以水或其他环境友好的试剂为主要洗脱溶剂的新型液相色谱技术正得到广泛的研究。
超高效液相色谱技术(UHPLC) 为了应对药物研发的需要，UHPLC 作为一种快速分离的色谱技术已经出现在各种药物的开发上。
根据UHPLC 的使用方法，讨论了如何针对不同样品建立稳定的 UHPLC 方法。
手性分离方面，UHPLC目前并没有大量小于2 μm 粒径的商品化手性色谱柱，但是利用传统的手性流动相添加法也可实现对手性杂质进行分离。
在实验室建设方面，分析实验室目前仍以 HPLC 为主要研究仪器，但为了获得类似于UHPLC 分离效能，许多科研工作者通过优化 HPLC系统同时使用核壳型色谱柱实现了快速分离。
以液态CO2 为主要流动相的SFC 技术，由于其与紫外联用检测灵敏度低，其发展一直非常缓慢，但质谱检测器(MS)的普及以及环境友好型社会的需要，使 SFC 能用于分离手性杂质。
虽然 SFC 与质谱联用技术用于杂质分析已有相关报道 ，但商品化的 SFC-MS联用仪器并未大量出现。
为实现对杂质的定量及定性分析，需要获取高纯度单一成分的杂质，然而杂质在药物中含量较低，利用分析型液相色谱技术制备杂质需要消耗大量时间，利用制备型液相色谱技术等方法可提高高纯度杂质的获取速度，加快杂质研究工作。经纯化的杂质可获得更高质量的图谱，但药物中杂质含量低的问题一直制约着杂质单体的获取速度。
利用液质联用方法可获得杂质的来源与简单结构，再利用强制降解 、结晶母液或直接合成等方式可制备出杂质单体制备技术上。
为了克服常规一维制备型液相色谱技术以及制备型SFC 色谱技术的方法建立困难、制备时间较长等缺点而提出制备型的二维液相色谱技术(Prep 2D-LC)以及二维 SFC 色谱技术已得到越来越多的应用。一种新型的 Prep 2D-LC，该仪器首先通过一维液相色谱对样品进行初步分离，并用质谱相对分子质量监控和中心切割的方式将目标物保存在样品环(Sample loop)中，再利用在柱洗脱(at column dilution)的方法将样品环中的样品进样至第二维液相色谱中，第二维液相色谱通过使用与第一维相同或者不同的流动相对样品进行进一步分离同时使用质谱监控方法即可得到更高纯度的目标物。这种新方法不仅替代了一维制备型液相色谱，同时解决了传统制备2D-LC 系统高压以及峰展宽的问题。
