蛋白手性柱使用六点注意事项
- 蛋白手性柱需要保存在叠氮化钠水溶液里,一般浓度为0.02%(w/v),其目的是为了防止菌类生长
- 蛋白手性柱使用前要用新鲜纯水过滤,冲走保存在里面的叠氮化钠
- 在使用蛋白手性柱前,也要确保仪器管路里面是水,也就是说需要用水过一遍仪器管路
- 准备工作做好后可以使用缓冲盐或缓冲盐与有机溶剂的混合液做流动相,在此注意有机相的比例要不大于10%,即小于等于10%,因为过度的有机相会损害蛋白,缓冲液的pH最好是在5以上,不然蛋白会变性,也不要大于7.5的pH。
- 用完蛋白手性柱后,立刻用新鲜纯水过滤后冲洗,把缓冲盐冲出来,至少冲30min,然后再冲叠氮化钠。
- 蛋白手性柱保存在冰箱,-4℃。